Версия сайта для людей с нарушением зрения
только для медицинских специалистов

Консультант врача

Электронная медицинская библиотека

Раздел 20 / 27
Страница 1 / 17

Глава 17. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СРЕДЫ И СИСТЕМЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЭМБРИОНОВ ЧЕЛОВЕКА

Со времени создания и внедрения в практику технологий ВРT было предложено большое количество культуральных сред для эмбрионов, различающихся по составу и способу использования: от простых растворов солей до сложных систем культивирования. Но, несмотря на новую информацию о физиологии, биохимии и функционировании генома и эпигенома эмбрионов человека, до сих пор не существует однозначного решения об «идеальной» среде для культивирования in vitro.

Если говорить об историческом аспекте разработки сред и систем культивирования эмбрионов человека, то стоит остановиться на трех основных стратегиях подбора компонентов среды.

Исторически разработка сред началась для работы в области физиологии. Это были среды, моделирующие состав, близкий к сыворотке крови. Они содержали NaCl, KCl, CaCl2 и низкие концентрации NaHCO3. Затем среды модифицировали, добавив Γлюкозу, и такой раствор получил официальное название Рингера-Локе. Впоследствии в состав среды добавили NaHPO4 и MgCl2. В варианте без Γлюкозы, но с увеличенной до 25 мМ концентрацией NaHCO3 раствор получил название KRB и использовался в условиях 5% CO2. Уэсли Уиттен (Whitten) модифицировал раствор KRB с добавлением Γлюкозы, пенициллина, стрептомицина и бычьего сывороточного альбумина. На этой основе была создана среда М16, широко используемая в экспериментальной эмбриологии.

Другое направление развития культуральных сред получило название «назад к природе». В соответствии с этим принципом в основу состава среды легли исследования состава жидкости фаллопиевых труб и матки. Для человека эта среда получила название HTF (от англ. human tubal fluid - жидкость маточной трубы человека). Однако достаточно сложно утверждать, что такой подход реализован в полной мере. Это обусловлено тем, что состав жидкости в матке и трубах может быть различен при разных условиях и у разных пациенток. Кроме этого, забор жидкости производили у небеременных, что уже не отражает ситуацию при наступлении беременности. Сложно учесть также влияние микроокружения эмбриона, материнских тканей. Помимо трубной жидкости, в окружение эмбриона может попасть некоторое количество семенной плазмы, и ее влияние также оценить достаточно сложно.

Для продолжения работы требуется вход / регистрация