Диагностика аллергии не представляет больших затруднений при наличии типичных симптомов у пациента. В целом решение проблемы диагностики аллергического заболевания значительно зависит от уровня профессиональной подготовки врача аллерголога-иммунолога. Анамнестические данные пациента являются определяющим компонентом в предполагаемом диагнозе аллергической болезни. Только анамнез более чем на 60% может определить клинический диагноз аллергического заболевания. Однако аллергологический диагноз, как известно, без подтверждающих диагностических тестов может быть только вероятным, и предполагаемый диагноз требует подтверждения аллергологическим обследованием.
Стандартная диагностика аллергического заболевания болезни включает:
- тщательно собранный аллергологический анамнез пациента;
- осмотр врача;
- подтверждение IgE — сенсибилизации с помощью тестов: in vivo (прик-тесты, внутрикожные пробы) и/или in vitro (определение уровня sIgE в сыворотке крови пациента).
В случаях несоответствия данных анамнеза и результатов клинико-лабораторных исследований на следующем этапе возможно проведение провокационных тестов, которые проводят пациенту в специализированных отделениях [1].
В идеале кандидатами для АСИТ должны быть пациенты с положительным аллергологическим анамнезом обострения аллергического заболевания после экспозиции с причинно-значимым аллергеном и положительными результатами аллергологического обследования [положительные кожные пробы и/или содержание sLgE в сыворотке крови >0,35 кЕ/л (не менее двух классов)].
В то же время не всегда удается выявить сенсибилизацию и, тем самым, найти причину аллергии. Иногда это бывает сложно подтвердить с помощью провокационных тестов, которые тоже имеют свои показания или существенные ограничения.
Сегодня многие из наиболее распространенных аллергенных молекул клонированы или очищены, описаны трехмерные структуры этих молекул, и их можно постоянно производить промышленным способом. Из-за растущего количества выявляемых аллергенов была предложена систематическая номенклатура аллергенов, одобренная Всемирной организацией здравоохранения и Подкомитетом номенклатуры аллергенов Международного союза иммунологических обществ (WHO/IUIS). Подкомитет отвечает за разработку и ведение систематической номенклатуры аллергенных молекул, а также за обширную базу известных аллергенных белков, доступную на www.allergen.org. Аллергенные молекулы называют, используя латинское название их семейства (род и вид). Например, аллергены, которые начинаются на Phl p, происходят от Phleum pratense (тимофеевка). Для отличия разных аллергенов из одних источников к названию добавляют номер (например, Phl p 1, Phl p 2 и т.д.). Номера присваиваются аллергенам в порядке их открытия. Молекулы аллергенов классифицируются по семействам белков в зависимости от их структуры и биологической функции [2].
Молекулярная аллергодиагностика — новая эра в диагностике аллергических заболеваний. Появление нового вида диагностики произошло конце 1980-х гг. благодаря внедрению ДНК-технологий, в результате чего удалось охарактеризовать и клонировать молекулы аллергенов и определить аллергенные детерминанты при различных аллергических заболеваниях.
Молекулярная аллергодиагностика применяется, если традиционных диагностических тестов, данных анамнеза недостаточно для выявления этиологически значимого аллергена и выбора лечебного аллергена для проведения АСИТ. Молекулярная аллергодиагностика является удобным и высокоточным инструментом для дифференцирования истинной сенсибилизации и перекрестных реакций у полисенсибилизированных пациентов, так как позволяет определить сенсибилизацию к аллергенам у пациента на молекулярном уровне.
Роль молекулярной аллергодиагностики стремительно возрастает среди рутинных лабораторных исследований. С момента внедрения в лабораторную диагностику молекулярной аллергодиагностики активно развивается и на сегодняшний день имеется более 130 аллергенных молекул для аллерген-специфического IgE-тестирования in vitro. Молекулярная аллергодиагностика на сегодняшний день реализуется в технологиях различных фирм-производителей. Золотым стандартом молекулярной аллергодиагностики является технология ImmunoCAP Allergen Components «Phadia AB».
Молекулярная аллергодиагностика — это молекулярное картирование аллергенной сенсибилизации пациента с применением высокоочищенных нативных аллергенов натурального происхождения или аллергокомпонентов (рекомбинантных аллергенных молекул), вместо цельных экстрактов аллергенов [3]. При молекулярной аллергодиагностике происходит количественное измерение sIgE против специфического аллергенного компонента IgE. sIgE показывают сенсибилизацию к соответствующему аллергенному компоненту.
В молекулярной аллергодиагностике для описания частоты встречаемости аллергокомпонентов применяются понятия «мажорного» и «минорного» аллергена.
Мажорные аллергокомпоненты (M) — это аллергенные молекулы, антитела к которым встречаются более чем у половины пациентов в популяции, реагирующей на данный источник.
Минорные аллергокомпоненты (m) — это аллергены с распространенностью менее 10% [4].
Первоначально молекулярная аллергодиагностика может казаться сложной, однако с приобретением все большего опыта в этой области полученная информация с помощью этого метода становится проще для понимания и дает больше полезных данных для практикующего врача-аллерголога. Это особенно актуально в случае диагностики перекрестной пищевой и пыльцевой аллергии и при выборе АСИТ.
Для проведения аллерготестов in vivo в настоящее время доступны экстракты аллергенов, представляющих собой природные смеси аллергенных и неаллергенных молекул, не стандартизированные по составу мажорных (главных) и минорных компонентов. Многие биологические источники содержат высокоактивные кросс-реагирующие аллергокомпоненты, например, профилин, который представлен с широкой вариабельностью в пыльце растений и растительных пищевых продуктах. Сенсибилизация вследствие воздействия таких паналлергенов служит причиной положительных результатов тестов (серопозитивности) к большому количеству экстрактов аллергенов. Некоторые молекулы являются уникальными маркерами специфических источников аллергенов, что позволяет определить первичную сенсибилизацию. В то же время у различных молекул аллергенов имеются общие эпитопы (антигенсвязывающие сайты), а одни и те же IgE-антитела способны взаимодействовать с различными молекулами аллергенов, имеющими сходную структуру, но различное происхождение и источники, обусловливая перекрестную реактивность. Мажорный белок — это показатель истинной аллергии, минорный белок — это показатель перекрестной реакции. Одной из самых важных характеристик молекулярной аллергодиагностики является свойство разделять истинную сенсибилизацию и сенсибилизацию, вызванную перекрестной реактивностью. Эта информация позволяет клиницистам определить, сколько источников аллергенов нужно учитывать при постановке диагноза: один, несколько близкородственных или несколько неродственных источников. Выявление перекрестно-реагирующих аллергенов предоставляет ценную информацию о сенсибилизации к нескольким разным источникам. У лиц с аллергопатологией могут продуцироваться sIgE к отдельным видам или общие антитела ко многим источникам аллергенов. Таким образом, пациент может иметь истинную сенсибилизацию ко многим неродственным видам из-за иммунологической перекрестной реактивности к структурно похожим аллергенам. Чем ближе виды друг к другу в таксономическом отношении, тем выше степень структурного и иммунологического сходства между аллергенами. Стоит отметить, что некоторые перекрестно-реактивные молекулы могут вызывать клинически значимые симптомы, в то время как другие не вызывают подобных симптомов.